El objetivo de este estudio fue evaluar el estrés producido por las guardias de 24 h en médicos residentes usando un enfoque multidimensional. Participaron dos grupos de médicos residentes que fueron seleccionados según el turno de trabajo: un grupo con privación de sueño (n = 42) que participó en una guardia activa de 24 h y otro grupo de contraste (n = 18) que participó en una jornada laboral normal sin privación de sueño. Todos completaron pre-post test durante un ciclo de 24 h realizadas las dos veces a las 8 h a.m. Las medidas incluyeron HRV, cortisol, rendimiento cognitivo y estado de ánimo transitorio. Los resultados mostraron que el efecto de la interacción grupo x fase fue significativa para todas las variables analizadas, indicando que los médicos en turno de guardia mostraban un deterioro significativo en todos los indicadores fisiológicos, de rendimiento y estado de ánimo en comparación con los participantes del grupo sin guardia. Estos resultados sugieren que es necesario revisar los sistemas de guardias médicas para reducir la carga de estrés que incide directamente en las condiciones de trabajo.